트리하이드록시메틸라미노메탄 77-86-1 분말의 투여에 대한 기본 원칙

트리스 분말생화학 및 분자생물학 실험에서 널리 사용되고 있습니다.그리고 실제 실험 조건에 따라 유연하게 조정되어야 합니다.실험의 안정성 및 신뢰할 수있는 결과를 보장하기 위해 과학적 원칙을 따라 세 가지 측면에서 복용량을 결정하는 논리를 분석하십시오.그리고 실험 목표.

1,실험 종류에 따라 기본 복용량을 결정합니다.

다른 실험에서는 트리스 분자에 대한 기능적 요구가 다릅니다. 이것은 기본 복용 범위를 결정합니다.트리스의 핵심 역할은 시스템의 pH 안정성을 유지하고 DNA 폴리메라스에 적합한 환경을 제공하는 것입니다.반응 시스템의 작은 부피와 pH에 대한 효소 활동의 민감성으로 인해 복용량은 정확해야합니다. 미리 설정된 버퍼 농도 (10-50mM) 에 따라 계산됩니다.pH가 8도정도 있어야 합니다..0 프라이머 결합, DNA 연장 등에 대한 요구 사항을 충족시키기 위해

트리스 염기 분말

젤 전소분석 실험에서, Tris는 TAE와 TBE와 같은 전소분석 버퍼를 준비하는 데 사용되며, 이는 pH 안정성을 유지할 뿐만 아니라 핵산 이동에도 도움을 준다.투여가 현장과 결합되어야 합니다.: 아가로스 젤 전자기술은 DNA 조각을 분리하는데 사용되며, 버퍼 농도는 보통 1 ×이며, 이는 제제 부피 (1-5L) 와 목표 농도에 따라 계산됩니다.폴리아크릴라마이드 젤 전자기술은 작은 분자 핵산을 분리하는 데 사용됩니다.버퍼 농도와 구성이 약간 조정되고 복용량은 그에 따라 최적화됩니다.젤 내부와 외부의 pH의 일관성을 보장하고 핵산의 확산과 흡수를 줄이기 위해.

2,실험 조건에 따라 복용량을 조정합니다.

온도, 초기 pH 값, 이온 강도 및 기타 요인은 Tris 완충 효율에 영향을 미치므로 복용량을 적절히 조정해야합니다.트리스의 pKa 값은 온도 증가에 따라 감소합니다., 고온 실험 (50 °C 이상의 효소 반응, 고온 전자기, 등) 에서 완충 용량이 감소하여 적절한 복용량 증가를 요구합니다.일반적인 반응에 37 °C에서 20mM가 필요하다면, 55 °C에서 25-30mM로 조정하여 pKa에 온도의 영향을 보상 할 수 있습니다.

시스템의 초기 pH와 Tris의 최적의 버퍼 범위 (7.2-8.8) 사이에 큰 오차가 있는 경우 pH를 먼저 소량의 산-기반으로 목표 범위 근처로 조정합니다.적당한 복용을 피하기 위해 복용량을 계산합니다.낮은 이온 강도 환경 (염 없는 반응 시스템과 같이) 에서 Tris 버퍼 효율이 향상됩니다.그리고 과도한 농도가 시스템에 비정상적인 오스모틱 압력을 유발하지 않도록 그 양을 줄일 수 있습니다.세포와 효소의 분자 활동에 영향을 미친다.

3,실험 목적에 따라 복용 계획을 최적화하십시오.

실험 목표는 Tris 복용량을 최적화하는 방향을 결정합니다. 예를 들어 "고순도 제품을 얻는 것" (핵산 추출 및 정화) 을 취하면트리스 버퍼는 불순물을 제거하고 분해로부터 핵산을 보호해야 합니다.복용량은 "충분한 버퍼링"과 "후속 단계를 방해하지 않는" 균형을 유지해야하며 농도는 일반적으로 10-20mM로 설정됩니다.이는 pH 변동으로 인한 핵산 분해를 막는 것뿐만 아니라, 그러나 또한 효소 소화, 염기서열 및 다른 실험에 잔류 간섭을 피합니다.

실험의 효율성을 최적화하는 것을 목표로 할 때 (예를 들어 효소 촉매 반응 상태 스크리닝), 트리스 복용량은 변수 경사량 테스트로 사용해야합니다.,10mM, 20mM, 30mM의 3개의 버퍼 용액 세트가 설치되어 제품의 양과 순도를 감지하고 균형 효율과 절감을 통해 최적의 복용량을 결정했습니다.장기적인 배양 실험에서 (세포 배양 버퍼 유지 등), 복용량은 주기를 고려하고, 농도를 적절히 증가시키고, 오랜 시간 동안 느린 pH 변화에 대처하고 실험 대상자의 안정적인 성장을 보장해야합니다.

요약하자면, 트리스 분말 복용량을 결정하려면 실험 유형에 따라 여러 가지 요인을 종합적으로 고려해야 하며,그리고 목적에 최적화실질적인 운영에서실험 전 결과를 문헌 참조 값과 결합하여 계획을 개선하는 것이 필요합니다. 그 버퍼 효과를 완전히 활용하고 원활한 실험과 정확한 결과를 보장하기 위해.

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