PCR 키트에서 생물학적 버퍼 MES 4432-31-9의 작용 메커니즘

분자 생물학 실험에서, PCR (중합 효소 연쇄 반응) 기술은 특정 DNA 단편을 효율적으로 증폭시키는 능력으로 인해 핵심 도구가되었다. 그러나, PCR 반응은 환경 조건, 특히 PH의 작은 변동에 매우 민감하며, 이는 DNA 폴리머 라제의 활성, 프라이머 및 템플릿의 결합 효율에 직접 영향을 미치며 심지어 비특이적 증폭을 초래할 수있다. 반응 시스템의 안정성을 유지하는 많은 "무대 뒤에서 영웅", 2- (N-Morpholino) Ethanesulfon acid (MES 버퍼), 효율적인 생물학적 완충제로서)는 고유 한 화학적 특성으로 인해 PCR 키트에서 필수 불가능한 "보이지 않는 가디언"이되었습니다.

1,,,정확하게 pH를 조절합니다

PCR 반응의 각 단계 - 변성, 어닐링 및 신장은 DNA 폴리머 라제의 정확한 촉매에 의존하며, 효소의 활성은 pH 환경에 크게 의존한다. MES의 PKA 값은 약한 산성 조건에서 우수한 완충 능력을 나타낼 수 있습니다. PCR 시스템에서, MES는 온도 변화 (예 : 고온 변성 동안의 산성 물질 방출과 같은) 또는 동적으로 양성자 화 및 탈 양성자 화를 통해 반응 과정에서 시약 첨가에 의해 야기 된 PH 변동에 효과적으로 저항하며, 최적의 DNA 폴리머 라제 내에서 반응 환경을 안정화시킨다. 이 '완충제 에스코트'는 효소가 각 사이클에서 효율적인 촉매 활성을 유지함으로써 증폭 효율의 감소 또는 pH 불균형으로 인한 불순한 생성물의 감소를 피합니다.

MES 파우더

2,,,호환성 장점

다른 완충제와 비교하여 MES의 분자 구조는 고유 한 호환성 이점을 제공합니다. Morpholine 고리 구조는 화학적 안정성을 향상시킬뿐만 아니라 PCR 반응에서 다른 성분과의 상호 작용의 위험을 줄입니다. 예를 들어, Mg ² ⁺ ⁺는 DNA 폴리머 라제의 필수 보조 인자이지만 과도하거나 불충분 한 양은 증폭 효율에 영향을 줄 수 있습니다. MES의 약한 산성 환경은 Mg ²의 용해도 및 활성 형태를 유지하는 데 도움이되며, 완충제와 금속 이온과의 결합으로 인한 유효 농도의 감소를 피합니다. 또한, MES의 낮은 이온 강도는 비특이적 정전기 상호 작용을 감소시켜 프라이머 이량 체화 또는 불일치 증폭의 확률을 더욱 감소시켜 고도로 특정한 생성물을 얻는 보장을 제공한다.

3,,,온도 적응성

PCR 반응은 고온과 저온 사이의 사이클링을 필요로하며, 이는 완충액의 안정성에 심각한 도전을 제기한다. MES의 열 안정성은 우수합니다. 고온 단계에서는 완충 용량이 온도에 의해 영향을받지 않으며 pH는 안정적으로 유지됩니다. 저온 어닐링 단계에서는 평형 상태를 빠르게 복원하여 프라이머 및 템플릿의 정확한 결합을 보장 할 수 있습니다. 이 특성은 ME를 긴 단편 PCR 또는 높은 충실도 PCR에 이상적인 선택으로 만듭니다. 전자는 더 긴 연장 시간이 필요하지만 후자는 효소의 지속적인 높은 활성에 의존하며 MES의 안정적인 완충 효과는 둘 다에 대한 신뢰할 수있는 지원을 제공합니다.

제품 포장

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