락타트 디히드로게네라스 검출 키트에서 생물학적 버퍼 HEPES 7365-45-9의 적용

임상 진단 및 생물학적 연구의 핵심 지표로서, 젖산 탈화수산화 (LDH) 검출 키트의 안정성과 정확성은 실험 결과의 신뢰성에 직접 영향을 미칩니다.반응기 킷의 여러 구성 요소 중, 생물학적 버퍼인 4-하이드록시 에틸 피페라진 에탄 수프론산 (HEPES 버퍼이 물질은 독특한 물리 화학적 특성으로 인해 검출 환경에서 pH 안정성을 유지하는 핵심 요소가되었습니다.

HEPES의 화학적 특성 및 장점

HEPES는 zwitterionic 생물학적 버퍼 에이전트이며, 분자 구조에는 piperazine 반지, hydroxyethyl, sulfonic acid 그룹이 포함되어 있으며, 우수한 버퍼 기능을 제공합니다.그 pKa 값은 7입니다..55, 생리학적 pH 값에 가깝고 pH 범위 6.8-8에서 효율적인 버퍼 성능을 보여줍니다.2, 특히 중성 상태에서 약 알칼리 상태의 생물학적 반응에 적합합니다.HEPES는 다음과 같은 중요한 장점을 가지고 있습니다.:

헤피스 분말

1낮은 흡수: 표면 무활성성으로 단백질 및 효소와 같은 비특정 생물 분자의 흡수를 줄일 수 있으며 실험 오류를 피할 수 있습니다.

2온도 안정성: 일반적인 실험실 온도에서 쉽게 분해되지 않으며 장기 실험 및 샘플 보존에 적합합니다.

3생체 호환성: 세포에 독성이 없으며 효소 활동이나 세포 대사에 영향을 미치지 않으며 생물학적 테스트의 안전 요구 사항을 충족합니다.

LDH 검출에서 반응기 키트는 세포 내 환경을 시뮬레이션해야합니다. HEPES의 위의 특성은 반응 시스템의 pH 안정성을 보장 할 수 있습니다.pH 변동으로 인한 효소 활동 왜곡 또는 샘플 분해를 피하는 방법.

LDH 검출 키트에서 HEPES의 메커니즘

LDH 검출의 핵심 원리는 효소 반응을 통해 NAD+를 NADH로 감소시키는 것이며, 이는 측정 가능한 포름알데히드 제품을 생성하기 위해 염색성 물질 (INT와 같은) 과 반응합니다.이 과정에서, pH의 가벼운 변화는 효소 활동, 기질 결합 효율 및 색상 반응 속도에 직접 영향을 줄 수 있습니다. HEPES는 다음과 같은 메커니즘을 통해 검출의 정확성을 보장합니다.

1. PH 안정성: 반응기 키트의 반응 시스템에서 HEPES 버퍼는 반응 과정에서 생성 된 수소 이온 또는 수산화 이온을 중화하고 일정한 pH를 유지할 수 있습니다.그리고 효소 반응이 최적의 조건에서 진행되도록 보장합니다.;

2반 간섭: 그것의 낮은 이온 강도 특성 반응에서 샘플에 불순물 (염과 단백질과 같은) 의 간섭을 줄일 수 있습니다.그리고 감지 감수성과 특수성을 향상시킵니다.;

3. 연장 보관 기간: 반응기 키트의 저장 단계 동안 HEPES는 pH 변동으로 인한 효소 또는 색소 반응기의 비활성화를 방지하고 반응기의 유효 기간을 연장 할 수 있습니다.

예를 들어 락테트 디히드로겐라스 세포독성 검출 키트를 들자면, 반응 시스템은 HEPES 버퍼, 락테트 기질, NAD + 및 색소 반응제를 포함한다. 검출 과정에서,HEPES 버퍼 (pH 7).5) 효소 반응 환경을 안정적으로 유지하여 NADH 생성 속도와 포름알데히드 제품의 색상 강도 사이의 선형 관계를 보장 할 수 있습니다.따라서 컬로미트릭 방법을 통해 LDH 활동을 정확하게 정량화합니다..

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