왜 Tris 버퍼 150-25-4에 감소 물질을 추가해야 하는가?

생물 과학 분야에서, 특히 단백질 화학과 생화학 연구에서, 단백질의 안정성과 활동을 유지하는 것은 매우 중요합니다.생활 활동의 주요 수행자로서단백질 구조와 기능의 무결성은 세포 내의 다양한 생명 과정에 결정적인 영향을 미칩니다.단백질은 다양한 환경 요인에 의해 쉽게 영향을 받습니다이 중 산화 현상이 중요한 영향을 미치는 요소입니다.시스테인 같은 아미노산 잔해를 산화하여 단백질의 구조와 기능을 파괴 할 수 있습니다..

트리스 버퍼

이 문제를 해결하기 위해 과학자들은 일반적으로 감소 물질을 포함하는 완충 용액을 사용합니다.트리스 버퍼, 실험 과정에서 트리스 버퍼는 우수한 버퍼 능력과 안정성으로 널리 사용됩니다.하지만 트리스 버퍼만 사용하면 산화 손상으로부터 단백질을 효과적으로 보호할 수 없습니다.따라서 감소 물질을 추가하는 것은 중요한 단계가되었습니다.

트리스 버퍼의 세 가지 일반적인 감소 물질
 

1디티오트레이톨 (DTT)

DTT는 일반적으로 사용되는 작은 분자 유기적 감소 물질이며, DTT를 Tris 버퍼에 추가하면 단백질 산화를 막을 수 있습니다.그것은 산화 후 디솔피드 결합을 포함하는 육각형 순환 구조로 변하는 선형 분자입니다.실험에서 DTT 농도는 일반적으로 5-10mM입니다. 감소 작용 물질의 농도가 버퍼의 단백질 농도보다 훨씬 높다는 것을 보장하기 위해.따라서 단백질을 산화 손상으로부터 보호합니다..

2트리 (2-카르보시에틸) 포스핀 (TCEP)

TCEP는 단백질 화학 및 단백질학 연구에서 광범위한 응용을 가진 티올 감소 물질입니다. DTT에 비해 TCEP는 더 높은 감소 효율을 가지고있을뿐만 아니라그러나 특정 티올 횡단 결합 반응에서 제거 할 필요가 없습니다.또한 TCEP는 안정성이 좋지만 가격이 상대적으로 높습니다.

3메르카프토에탄올 (β-메르카프토에탄올, BME)

메르카프토에탄올은 일반적으로 사용되는 환원 물질로 단백질에 있는 자유 티올 그룹을 산화로부터 보호하여 단백질 집적 또는 변성을 방지할 수 있다.메르카프토에탄올의 감소 능력은 상대적으로 약합니다.또한, mercaptoethanol의 휘발성성 때문에,풀 용액에 첨가하여 휘발성으로 방울로 분산하여 지속적인 감소를 제공 할 수 있습니다..

제품 포장

사용 주의 사항

트리스 버퍼는 일반적으로 실온에서 준비되지만, DTT 및 mercaptoethanol와 같은 환원 물질은 실온에서 쉽게 분해됩니다. 따라서이 감소 물질이 버퍼에 추가되면, 낮은 온도 냉장고에 보관하는 것이 좋습니다. 또한 좋은 결과를 보장하기 위해 실험 전에 Tris 버퍼에 환원 물질을 추가 할 수 있습니다.

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