트리스의 버퍼 범위는 약 6-8이므로 대부분의 생화학 실험에 적합하며, 특히 단백질과 핵산 관련 연구 실험에 적합합니다.EPPS 버퍼또한 단백질과 핵산에 적합합니다. 연구 실험은 Tris보다 더 비싸서 단백질 실험을 탐지하기 위해 Folin phenol 방법에 적합합니다.
폴린-페놀 반응기 방법은 단백질 농도를 결정하는 데 일반적으로 사용되는 기본 방법이며 생화학 분야에서 널리 사용되었습니다.EPPS (HEPPS) 는 일반적으로 단백질 함량을 탐지하기 위해 Folin 페놀 방법의 버퍼로 사용됩니다.트리스의 버퍼를 사용하는 것보다
버퍼 트리스와 EPPS는 단백질 함량을 검출하는 데 사용됩니다.
단백질 함량을 결정하기 위한 폴린 페놀 방법의 염색 원리는 비우레트 방법과 동일합니다 (그러나 EPPS는 비우레트/비우레트 검출에 사용할 수 없습니다).그 차이점은 두 번째 반응체가, 폴린-페놀 반응 물질이 첨가됩니다. 색의 양을 증가시키기 위해 단백질 검출의 민감도를 향상시킵니다.단백질 함량을 검출하기 위한 폴린 페놀 방법의 장점은 높은 감수성을 가지고 있으며 비우레트 방법보다 훨씬 더 민감하다는 것입니다.물론, 그것은 또한 시간이 오래 걸리고, 표준 곡선이 직하지 않고, 특성이 낮고, 더 많은 방해 물질이 있다는 몇 가지 단점이 있습니다.
-CO-NH2, -CH2-NH2, CS-NH2 및 Tris 버퍼, 사카로스, 암모늄 황산, 그리고 황화수 화합물과 같은,포린-페놀 반응에 방해를 가하고 후자를 훨씬 더 크게 영향을 줄 수 있습니다.또한 페놀과 시트릭산도 이 반응을 방해합니다.
폴린 페놀 반응제는 두 가지 반응제로 구성됩니다. 반응제는 나트륨 탄산, 나트륨 하이드록시드, 구리 황산 및 칼륨 나트륨 타트라트로 구성됩니다.단백질 내의 펩타이드 결합은 알칼리 상태에서 칼륨 나트륨 구리 타트라트 용액과 반응하여 보라색-붉은 복합체를 형성합니다.두 번째 반응제는 포스포몰리브드산, 포스포트?? 스틱산, 황산, 브롬 등으로 구성되어 있습니다. 알칼리 상태에서는이 반응제는 단백질에 있는 티로신의 페놀 그룹에 의해 쉽게 감소되어 파란색 반응이 발생합니다.이 방법은 티로신과 트립토판의 함량을 결정하는 데도 적합합니다.이 방법의 측정 범위는 25-250μg 단백질입니다..
요약하면 단백질 함량을 결정하는 Folin 페놀 방법의 장점은 높은 민감성이지만 단점은 시간이 오래 걸리고 방해한다는 것입니다.트리스도 간섭을 일으킬 수 있습니다.EPPS 버퍼를 사용해야 합니다.생물학적 버퍼어떤 것이 더 좋은지 말하지 않고, 다른 실험 연구에 적합합니다.
