헤페스의 전체 이름은 4가지 하이드록시에틸피페라진 에탄술포닉 산이고 CAS는 7365-45-9입니다, 헤페스가 종종 생물학적 버퍼, pH 버퍼 범위에서 사용됩니다 : 6.8-8.2, 헤패스 완충 용액의 주성분은 하이드록시에틸피페라진 에틸 황산입니다, 헤페스가 물에 녹은 양성적 버퍼입니다 그리고 금속 이온과 안정적 복소수를 형성하지 마세요. 그것은 7.2-7.4의 수소 이온 농도 지수에서 좋은 완충능을 가집니다. 그것은 대부분 생화학적 진단상의 키트, DNA / RNA 추출 키트와 PCR 진단상의 키트에서 사용됩니다.
다양한 생화학 반응에서 사용됩니다 :
1. 헤패스 완충 용액은 종종 여러가지 유형의 유기체, 세포-세포 부착, 단기간 세포 집합과 문화의 세포 배양 매체에서 버퍼 반응제와 세정 티슈와 세포를 위한 버퍼로서 사용됩니다 ;
2. 단백질 리서치에서, 파이프는 종종 양이온 교환 크로마토그래피에서 결합된 버퍼의 성분과 용리제로서 사용됩니다 ;
3. DNA 연구에서, 파이프는 인산 칼슘과 DNA 침전 형성 시스템을 위한 버퍼로서, 그리고 AFM과 일렉트로포레이션 실험을 위한 버퍼로서 사용됩니다.
4. 게다가 헤페스는 DNA와 제한 엔자임 사이의 반응에 어떤 간섭을 가지고 있고 단백질 함량을 결정하는 것은 라우리의 방법에 적합하지 않습니다.
5. 헤패스 완충 용액은 종종 생화학적 진단상의 키트, DNA / RNA 추출 키트와 PCR 진단상의 키트와 더불어, 오르가넬러의 조사와 대단히 변하기 쉬운, ph 민감성 단백질과 효소에서 사용됩니다.
6. RNA 핵구성 요소를 분리하고 분석하기 위한 반응 버퍼와 프리 하이브리다이제이션 버퍼와 이종 교배 버퍼 ; RNA와 T4RNA에 대해 사용됩니다. 분자 생물학 등급은 T4 RNA 리가제, 분리로 RNA의 3 '-마지막을 라벨링하고 핵 RNA의 반응 버퍼, 프리 하이브리다이제이션 버퍼와 이종 교배 버퍼의 부품을 분석하는데 사용됩니다.
헤페스 관련 사항
1. 대부분의 세포에 요구된 pH 7.2-7.4 이지만, 그러나 셀 문화를 위한 적절한 pH 배양되는 세포의 종류에 따라 변화합니다. 섬유아세포가 더 높은 pH (7.4-7.7)를 선호하는 반면에, 형질 전환 세포주의 도입은 신맛을 요구합니다. pH (7.0-7.4). 대부분의 배양액 이후로 (NaHCO3)와 이산화탄소가 나트륨 중탄산염의 체제에 의해 버퍼링되, 기상에 이산화탄소 농도는 배양액에 나트륨 바이카보네이트 농도 있어야 합니다. 기상에 또는 인큐베이터 공기에서 이산화탄소 농도가 5%에 설정된다고 NaHCO3의 양은 덧붙였으면 문화에 해법은 1.97g/L입니다 ; 이산화탄소 농도가 10%로 유지된다고 NaHCO3의 양은 덧붙였으면 문화에 해법은 3.95g/L입니다. 셀 문화 병마개는 가스 교환을 보증하기 위해 또한 팽팽하게 비틀어지지 말아야 합니다 ;
2. HCO3과 이산화탄소 버퍼 쌍을 사용하는 배양 용액의 pH 값은 불안정하고, 일정한 기간 동안 저장 뒤에 알칼리성인 경향이 있습니다. 만약 배양액의 pH 또한 빨리 변하면, 헤패스 완충 용액이 10-25mM의 최종 농도에 배양액에 추가될 수 있습니다 ;
3. 헤페스는 양성적 버퍼이고 대부분 산화성 인산화 반응, 무균 환경에서 단백질 합성, 광합성적 인산화, 이산화탄소 정착, 기타 등등과 같은 생물학적 조사에 사용했습니다 ; 헤페스는 금속 이오나스의 기판에 어떤 영향도 미치지 않고, 전자 현미경 검사 (TEM)에 전송에 적합합니다 ; 셀 문화 매체에, 장점은 그것이 노지지배 또는 세포 관찰 동안 상대적으로 끊임없이 계속되는 pH 값을 유지할 수 있다는 것입니다. 헤페스 (25mM)는 고농도 이산화탄소 배양 환경의 제한을 완화하기 위해 비카보네이트 버퍼을 대체로서, 또는 비카보네이트 버퍼 (10-15mM)의 추가로서 사용될 수 있습니다. 유용성 이산화탄소와 중탄산염은 또한 매우 좋은 세포 성장에 중요합니다.
