바이러스 표본 추출 관에서 추가된 바이러스 수송 매체의 2가지의 유형이 있습니다, 사람은 변경한 세포 용해 바이러스 단백질 적출 핵산의 활동되지 않ㄴ 보전 해결책이고, 다른 사람은 바이러스 생체외 활동, 그것의 핵산의 정비이고 변경된 항원은 중간 수송에 기초를 두어 비 활동되지 않ㄴ 보전 해결책을 완료합니다. 활동되지 않ㄴ 보전 해결책을 위해, 바이러스를 능률적으로 활동하지 않고 이차 감염을 방지하는 것이 중요합니다.
비 활동되지 않ㄴ 유형과 다른, 활동되지 않ㄴ 바이러스 수송 매체는 바이러스를 능률적으로 활동하지 않고을 이차 감염에서 효과적으로 통신수를 막을 수 있는 세포의 용해 소금의 높은 농도로 추가됩니다. 그러나 그것은 또한 NT-PCR에 의해 연속적으로 검출될 수 있다 그래야, 강직에서 바이러스성 핵산을 보호할 수 있는 Rnase 억제물을 포함합니다. 비활성화 효력은 실험적으로 아래에 확인됩니다.
1. 비활성화 검증 물자
1마리의 SPF 닭 태아 (와 오래된 10 일에 스스로 부화해)
2 닭 전염하는 기관지염 바이러스 IBV QXL87 긴장
3 정상적인 염분 (0.9% NaCl), 압력가마로 소독하는
4개의 활동되지 않ㄴ 표본 저장 해결책, 3개의 배치.
5개의 RNA 적출 장비
바이러스 수송 매체는 바이러스를 활동하지 않습니다
2. 실험 방법
1. 1의 비율에 따라 보전 해결책에 준비한 닭 전염하는 기관지염 바이러스 QXL87 긴장을, 추가하십시오 (바이러스성 해결책): 10는 45min를 위한 18-26℃에 (보전 해결책), 실내 온도를 놓았습니다. 바이러스 액체는 SPF 닭 태아로 접종되고, 요낭 액체는 가을걷이되었습니다.
2. 요낭 구멍 접종 방법에 따라 10마리 일 오래된 SPF 닭 태아로 1에서 가을걷이된 요낭 액체를 접종하십시오. 각 표본은 10마리의 닭 태아, 0.1 mL/piece로 접종되고, 144 h를 위한 37°C 부화기에서 두고 버려집니다. 죽은 닭 태아의 24의 h 후에, 접종 후에 병에 걸리는 살아있는 태아의 닭 태아 죽음 그리고 수의 24-44 h를 관찰하고 기록하십시오. 닭 태아 병변의 관측, 그리고 RNA를 추출하기 위하여 GB/T 23197-2008 닭 전염하는 기관지염 진단 기술을, RNA 적출 장비를 사용하는 참조하고, 바이러스 탐지를 위해 원스텝 방법 순간 RT qPCR를 사용하는 닭 가을걷이된 요낭 유동성에 전염하는 기관지염 바이러스 핵산의 탐지.
1/2/3마리의 추가한 바이러스 (100ul)를 + 보전 해결책 (900ul) 분류하십시오; 그룹 4는 바이러스 (100ul)를 + 생리 염분 추가했습니다 (900ul); 그룹 5/6/7 추가된 보전 해결책 (1000ul). 그(것)들의 사이에서, 바이러스 수송 매체는 3개의 배치에 있습니다.
3. 실험적인 결과
상기 실험적인 결과에 따르면, 그룹 1, 2 및 3는 닭 태아는 일반적으로 성장했다는 것을 보여준 바이러스 포함 부식방지제로 접종되었습니다; 그룹 4는 바이러스 추가된 생리 염분의 및 닭 태아 병변으로 접종되었습니다; 그룹 5, 6, 및 7는 닭 태아 성장의 아무 금지도 보여주는 부식방지제로 접종되지 않았습니다. 이것은 활동되지 않ㄴ 보전 해결책이 바이러스를 활동하지 않을 수 있다는 것을 나타냅니다.
이 실험을 통해, 우리는 마지막으로 Desheng의 임의 표본 추출법의 3개의 배치가 보전 해결책을 효과적으로 바이러스를 활동하지 않을 수 있다는 것을 활동하지 않고, 세포의 정상적인 생리 기능에 대한 억제 효과가 없다는 것을 보여주어서 좋습니다. 그러므로, 이 활동되지 않ㄴ 바이러스 수송 매체 RT qPCR 핵산 탐지 실험을 위해 적당한 그것은 능률적으로 각종 바이러스를 활동하지 않고 핵산을 추출할 수 있습니다. 당연히, 더 빠른 테스트에 비추어, 어쨌든 새로운 크라운 바이러스는 얻기 이렇게 쉽지 않기 때문에, 환자의 탐지를 위해 직접 사용되는 새로운 크라운으로, 중국에 있는 몇몇 회사 이렇게 할 것입니다 진단했습니다!
