HEPES (4- ((2-하이드록시에틸)-1-피페라즈아니테네솔폰산) 은 zwitterionic 버퍼이며 CAS 번호 7365-45-9,이 버퍼는 일반적으로 생화학 실험에서 반응 시스템의 PH를 조정하는 데 사용됩니다.바이러스 보존 용액 또는 세포 보존 용액과 같은 물질로 세포에 독성이 없으며 PH를 오랫동안 유지합니다.
HEPES 버퍼이온이 아닌 암포테릭 버퍼로 pH 7.2~7 범위에서 좋은 버퍼 능력을 가지고 있습니다.4그 주요 특징은 문화 매체 또는 세포 관찰에서 비교적 안정적인 PH 값을 유지하는 것입니다.필요한 탄산이 공기 속으로 빠져나오지 않도록 세포 배양 플라스크의 뚜?? 을 단단히 묶어야 합니다..
HEPES 버퍼를 준비하는 방법
필요한 농도로 준비된 배양 매체에 직접 헤페스 버퍼를 첨가하고 필터 살균을 수행할 수 있습니다. 배양 용액 1000ml에 2.38g의 헤페스 분자를 첨가합니다.PH를 7로 조절합니다..2 1NNaOH로 녹여서 필터링하고 적용하기 전에 살균하면 HEPES 농도는 10mmol/L입니다.
세포 배양 매개체의 99ml 용액을 1ml 주류 용액에 첨가하면 HEPES의 농도는 또한 10mol/L입니다. 아래는 1mol/L로 HEPES 주류 용액을 준비하는 방법입니다. 먼저 23을 녹여서8g의 HEPES를 90ml의 이중 디스틸 물에 넣습니다.두 번째로, 1N NaOH로 pH를 7.5-8.0으로 조정합니다. 셋째,수 타이틀로 100ml까지 만들어집니다.
고온 내성 및 200°C까지의 녹는점으로,HEPES 분자는 오토클래브에 의해 분해되지 않습니다. 관련 문헌에 따르면,HEPES 수분 용액이 3시간 동안 주변 빛에 노출되면, 독성 수소 과산화물 (H2O2) 이 생성됩니다. 따라서,2가지 점에 주의가 필요합니다.하나는 HEPES 수분 용액은 실험 결과에 영향을 미치지 않도록 빛에서 멀리 보관해야합니다.용매로 구성 된 후 더 나은 결과를 위해 4 °C에서 보관하고 짧은 시간에 사용해야합니다.다른 한 가지 는 일반적으로 건조 한 방 에 배치 되어 있고, 오랫동안 햇빛 에 직접 노출 될 수 없다.
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