트리스: 트리메틸올 아미노메탄
트리스메틸라미노메탄 (Tris) 은 공식 (HOCH 2) 3CNH 2의 유기 화합물이다.트리스 기반생화학 및 분자생물학 실험에서 버퍼를 준비하는 데 사용됩니다. 생화학 실험에서 사용되는 TAE 및 TBE 버퍼 모두 (핵산 용해에 사용됩니다) 는 Tris를 필요로합니다.아미노 그룹을 함유할 때 알데히드와 응고할 수 있습니다.버퍼 특성 트리스는 약한 기체입니다. 방온 (25°C) 에서 pKa는 8입니다.1버퍼 이론에 따르면, 트리스 버퍼의 효과적인 버퍼 범위는 pH 7.0과 9 사이입니다.2.
트리스 염소의 수분 용액의 pH는 약 10입니다.5일반적으로 염화수소를 첨가하여 pH값을 원하는 값에 조정하고 이 pH값을 가진 완충 용액을 얻을 수 있습니다.트리스의 pKa에 대한 온도의 영향은 통제되어야 합니다..
트리스 버퍼는 약한 알칼리 용액이기 때문에 그러한 용액에서 DNA는 디프로톤화되어 용해성을 향상시킵니다.사람들은 종종 "TE 버퍼"를 만들기 위해 Tris 염수산 버퍼에 EDTA를 추가합니다.. TE 버퍼는 DNA 안정화 및 저장에 사용됩니다. pH 조절된 산 용액을 아세트산으로 대체하면 "TAE 버퍼" (Tris/Acetate/EDTA) 가 얻습니다.그리고 보리산으로 대체되면, "TBE 버퍼" (Tris/Borate/EDTA) 를 얻는다. 이 두 버퍼는 핵산 전소분석 실험에서 사용됩니다.
1 M Tris-HCl (pH7)476, 8.0)
구성 요소 농도 1M Tris-HCl
준비 용량 1L
제조 방법:
11리터 컵에 121.1g의 트리스를 넣습니다.
2약 800ml의 탈이온화 물과 녹기 위해 섞어.
3필요한 pH 값을 조정하기 위해 아래 표에서 보이는 농축 HCl의 양을 첨가합니다.
pH 농축된 HCl
70.4 약 70ml
70.6 약 60ml
8.0 약 42ml
4용액을 1L로 가져오세요.
5고온 및 고압 살균 후 방온에서 보관합니다.
참고: Tris 용액의 pH 값이 온도에 따라 크게 변하기 때문에 pH 값을 조정하기 전에 방온으로 식도록 허용합니다.온도가 1°C 상승하면, 용액의 pH 값은 약 0.03 단위로 감소합니다.
1.5 M 트리스-HCl (pH8.8)
구성 요소 농도 1.5M Tris-HCl
준비 용량 1L
제조 방법
11리터 컵에 181.7g의 트리스를 넣고
2약 800ml의 탈이온화 물과 녹기 위해 섞어.
3농축된 HCl로 pH를 8.8로 조절합니다.
4용액을 1L로 가져오세요.
5고온 및 고압 살균 후 방온에서 보관합니다.
참고: 용액의 pH 값이 온도에 따라 크게 변하기 때문에 pH 값을 조정하기 전에 방온으로 냉각해야합니다.
온도가 1°C 증가할 때마다 용액의 pH는 약 0.03 단위로 감소합니다.
Tris-HCl 버퍼의 장점은 다음과 같습니다.
1Tris 염소는 더 알칼리성이기 때문에 이 버퍼 시스템을 사용하여 산성에서 알칼리성까지의 pH 값의 폭이 넓은 버퍼 용액을 준비할 수 있습니다.
2 생화학적 과정에 약간의 간섭, 칼슘, 마그네슘 이온 및 중금속 이온의 침착이 없습니다.
단점은 다음과 같습니다.
1 버퍼 용액의 pH 값은 용액의 농도에 크게 영향을 받으며, 버퍼 용액은 10 배가 희석되고, pH 값의 변화는 0보다 크다.1;
2온도 효과는 크며, 온도 변화는 버퍼 용액의 pH 값에 큰 영향을 미칩니다.031예를 들어, 4°C=8의 버퍼 용액의 pH4, 37°C의 pH 값은 7입니다.4, 따라서 사용 온도에서 준비해야합니다, 방온에서 준비 된 Tris-HCl 버퍼는 0 °C ~ 4 °C에서 사용할 수 없습니다.
3 공기 중의 CO2는 쉽게 흡수되기 때문에 준비된 버퍼는 단단히 밀폐되어야 합니다.
4 이 버퍼 용액은 특정 pH 전극에 간섭할 수 있으므로 Tris 용액과 호환되는 전극을 사용하십시오.
트리스 용액은 공기로부터 이산화탄소를 흡수할 수 있습니다. 보관 중에 밀폐에 주의를 기울여야 합니다.
TE는 Tris-EDTA 버퍼 (10mM Tris, 1mM EDTA, pH7.4 pH7.6 pH8.0) 이다.
일반적으로 DNA 해체를 위한 분자 생물학 반응제.
10×TE 버퍼 (pH7) 를 준비합니다.476, 8.0)
구성 요소 농도: 100mM Tris-HCl, 10mM EDTA
준비 용량: 1L
제조 방법:
1다음 용액을 측정하고 1L 컵에 넣습니다.
1M Tris-HCl 버퍼 (pH7.476, 8.0) 100ml
500mM EDTA (pH8.0) 20ml
2약 800ml의 이온화 된 물을 컵에 넣고 균등하게 섞습니다.
3부피를 1L로 조정 한 후 고온과 고압에서 살균합니다.
4방 온도에서 보관합니다.
