Tris: trimethylol aminomethane
Trismethylaminomethane (Tris)는 공식을 가진 유기화합물입니다 (생화학과 분자 생물학 실험에 있는 완충기를 준비하기 위하여 HOCH 2) 3CNH 2. Tris는 이용됩니다. 핵산을 녹이기 위하여 이용되는 생화확적인 실험에서 이용된 TAE와 TBE 둘 다 완충기는 () 아미노기를 포함할 때 알데하이드로 집광할 수 있는 Tris를 요구합니다. 특성 Tris를 부드럽게 하는 것은 약한 기초입니다. 실내 온도에 (25°C)는, 그것의 pKa 8.1입니다. 완충 이론에 따르면, Tris 완충기의 효과적인 완충 범위는 PH 7.0와 9.2 사이에서 있습니다.
Tris 기초의 수성 해결책의 PH는 대략 1 0.5입니다. 일반적으로, 염산은 목표값에 PH 값을 맞추기 위하여 추가되고, 그 때 이 PH 값을 가진 완충기 해결책은 얻어질 수 있습니다. 그러나 동시에, Tris의 pKa에 온도의 영향은 통제되어야 합니다.
Tris 완충기가 약한 알칼리성 해결책이기 때문에, DNA는 그로 인하여 그것의 가용성을 개량하는 그런 해결책에서, deprotonated. 사람들은 Tris 염산 완충기에 수시로 “TE 완충기”를 만들기 위하여 EDTA를 추가합니다. TE 완충기는 DNA 안정화와 저장을 위해 이용됩니다. PH 조정된 산성 해결책이 아세트산으로 교환되는 경우에, 붕소 산 교환되는 경우에 “TAE 완충기”는 (Tris/Acetate/EDTA), “TBE 완충기”로 (Tris/Borate/EDTA) 얻어집니다 얻어지고. 이러한 두 종류 완충기는 핵산 전기 이동법 실험에서 이용됩니다.
1개 M Tris HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)
구성요소 농도 1M Tris HCl
준비 양 1L
준비 방법:
1. 1L 비커로 121.1g Tris의 무게를 다십시오.
2. 이온을 제거한 물의 800ml에 관하여 추가하고 녹이기 위하여 약동하십시오.
3. 필수 PH 값을 조정하기 위하여 아래에 테이블에서 보이는 것처럼 집중한 HCl 양을 추가하십시오.
PH에 의하여 집중되는 HCl
70ml에 관하여 7.4
60ml에 관하여 7.6
42ml에 관하여 8.0
4. 1개의 L.에 해결책을 가져오십시오.
5. 고열과 고압 살균 후에, 실내 온도에 저장하십시오.
주: 해결책이 PH 값을 조정하기 전에 실내 온도에 냉각하는 것을 허용하십시오 Tris 해결책의 PH 값이 온도로 매우 변화하기 때문에. 온도가 1°C에 의하여 증가할 때, 해결책의 PH 값은 대략 0.03 단위에 의하여 줄입니다.
1.5 M Tris HCl (pH8.8)
구성요소 농도 1.5M Tris HCl
준비 양 1L
준비 방법
1. 1L 비커에 있는 181.7g Tris의 무게를 다십시오.
2. 이온을 제거한 물의 800ml에 관하여 추가하고 녹이기 위하여 약동하십시오.
3. 집중한 HCl에 8.8에 PH를 맞추십시오.
4. 1개의 L.에 해결책을 가져오십시오.
5. 고열과 고압 살균 후에, 실내 온도에 저장하십시오.
주: 해결책은 PH 값을 조정하기 전에 실내 온도에 Tris 해결책의 PH 값이 온도로 매우 변화하기 때문에, 냉각되어야 합니다,
온도에 있는 각 1°C 증가를 위해, 해결책의 PH는 대략 0.03 단위에 의하여 줄입니다.
Tris HCl 완충기의 이점은:
Tris 기초가 알칼리성 이기 때문에 ①, 당신은 이 완충기 신랄한에서 알칼리성에 PH 값의 광범위를 가진 완충기 해결책을 준비하기 위하여 체계를 이용할 수 있습니다;
② 생화확적인 과정에 조금 방해, 칼슘을 가진 강수 없음, 마그네슘 이온 및 중금속 이온.
불리는:
①는 해결책의 농도에 의해 완충기 해결책의 PH 값 매우 영향을 받습니다, 완충기 해결책은 10 시간 묽게 되고, PH 값에 있는 변화는 0.1보다 더 중대합니다;
②는 온도 효과 크, 온도 변화에는 완충기 해결책의 PH 값에 중대한 영향이, 있습니다 즉: △pKa/℃=-0.031, 예를 들면: 4℃=8.4에 완충기 해결책, 그 후에 PH 값, 그래서 37℃= 7.4에 그것의 PH는 0개의 ℃ ~ 4 ℃에 사용 온도에, 실내 온도에 준비된 Tris HCl 완충기 사용될 수 없습니다 준비되어야 합니다.
③ 공기에 있는 이산화탄소를 흡수하는 것은 쉽습니다, 그래서 준비한 완충기는 단단히 밀봉되어야 합니다.
④는 특정 PH 전극과 이 완충기 해결책 방해할 것입니다, 그래서 Tris 해결책과 호환이 되는 전극을 사용하십시오.
Tris 해결책은 당신이 무균을 요구하는 경우에, 당신 나트륨 아지드를 추가할 수 있습니다 공기에서 이산화탄소, 저장 도중 밀봉에 주의 흡수할 수 있습니다.
TE는 Tris EDTA 완충기 (10mM Tris의 1mM EDTA, pH7.4 pH7.6 pH8.0)입니다.
DNA 해체를 위한 통용되는 분자 생물학 시약.
10×TE 완충기 준비하십시오 (pH7.4, 7.6, 8.0)를
구성요소 농도: 100mM Tris HCl의 10mM EDTA
준비 양: 1L
준비 방법:
1. 뒤에 오는 해결책을 측정하고 1L 비커에서 두십시오.
1M Tris HCl 완충기 (pH7.4, 7.6, 8.0) 100개 ml
500 mM EDTA (pH8.0) 20ml
2. 이온을 제거한 물의 800ml에 관하여 비커에 추가하고 균등하게 섞으십시오.
3. 1L에 양을 맞추기 후에, 고열과 고압에 살균하십시오.
4. 실내 온도에 저장하십시오.
