혈청 또는 혈중에서 자유 지방산의 결정은 일반적으로 트린더 염색체 효소 광 측정 방법을 채택합니다. 그러나이 테스트의 특성으로 인해지방산 검출에 많은 요인이 영향을 미친다.검출의 정확성을 높이기 위해 검출 방법을 최적화하고 개선해야합니다.
트린더 크로모겐 검출 FFA 원리:
검출 방법은 세 가지 반응 단계가 있습니다: 자유 지방산 (FFA 또는 NEFA) 은 아세틸-코아 합성분 (ACS) 의 작용으로 과도한 CoA와 반응하여 아실-코아를 생성합니다.아세틸 코아 산화酶 (ACO) 의 작용으로 산소와 반응합니다.이 반응은 2,3-트랜스 에놀 코아와 수소 과산소를 생성하고, 트린더 반응은 수소 과산소를 감지하기 위해 사용되며 FFA 함량을 얻을 수 있습니다.
크로모겐의 FFA 결정에 TOPS가 권장됩니다.
FFA 결정 및 최적화 방법의 문제:
1반응에 과도한 코엔자임 A는 과산화수소와 트린더 크로모겐의 반응을 방해하여 전체 테스트 결과를 낮게합니다.N- 에틸 말레이마이드 (NEM) 는 과도한 코엔자임 A를 제거하는 데 사용될 수 있습니다.NEM의 안정성은 매우 영향을 받습니다. 한주일만요.
2사용 된 아세틸 CoA 합성분과 아세틸 CoA 산화제는 다른 자유 지방산에 대한 다른 기질 특성을 가지고 있으므로 결정 결과에 차이가 있습니다.각기 다른 효소 원천은 다른 C 사슬 길이의 자유 지방산에 대한 각기 다른 기질 특성을 가지고 있습니다.즉, 반응 능력은 다릅니다. 인간 혈청에 6 종류의 FFA가 있으며, 그들에게 높은 특성을 가진 효소만이 측정 결과에 아무런 차이를 만들 수 없습니다.
3반응에 CoA의 영향으로 인해 데이터 결과의 선형 범위는 좁습니다. 시장에서 측정 된 FFA의 색상은 MEHA, TBHB, TOOS 등이지만 CoA에 의해 크게 방해됩니다.그리고 그것은 과도해야 합니다., 그래서 간섭이 필요합니다. 크로모겐이 적습니다. SCEP는 코엔자임 A에 의해 간섭되지 않지만 불안정합니다. ADOS와 TOPS는 CoA에 의해 덜 간섭되며, TOPS는 더 높은 모ляр 흡수 계수를 가지고 있습니다.그래서 그것은 더 나은 크로모겐 기판입니다.
4. NEM의 양을 줄이기 위해 수 sulfhydryl 복합 DTNB 및 MIT을 추가하십시오. DTNM의 sulfhydryl 그룹은 CoA의 sulfhydryl 그룹과 반응하여 염색체에 대한 간섭을 제거 할 수 있습니다.소량의 MIT는 CoA의 수 sulfhydryl 그룹을 제거 할 수 있으며 또한 보존 물질로 작용합니다.TOPS 크로모겐을 사용함으로써 CoA의 간섭은 완전히 제거 될 수 있으며 안정성은 크게 향상됩니다.
FFA 결정 결과에 대한 더 높은 요구 사항이있는 경우 위의 점을 기반으로 더 나은 품질의 키트를 선택할 수 있습니다.Desheng는 FFA와 다른 지수 결정 키트의 원료를 생산합니다.FFA를 직접 결정하기 위해 TOPS가 사용되면 용액의 안정성이 떨어지기 때문에 사용 전에 즉시 사용하도록 작동 용액을 준비하는 것이 좋습니다.
