실험을 위한 적당한 생물학 완충기를 선택하는 것은 어려운 업무일 수 있습니다. 유효한 쉽게 혼란을 일으키는 원인이 될 수 있는 많은 선택권이 (Hepes, Mops, Tris, Bis Tris, 등) 있습니다.
이 도전을 이해한 후에, Desheng는 당신의 참고를 위해 연구를 위한 완충기 소금을 선택할 때 짧은 명단을 준비했습니다:
1. 완충 범위
각 완충기 시약에는 가장 강한 완충능을 가진 PH 범위가 있습니다. 이 완충능은 완충기 시약의 pKa에 의해 보통 결정됩니다. 당신은 원한 범위의 중앙에 pKa 가치 가깝 것을 가진 완충기를 선택해야 합니다 (전형적으로, 표적 PH의 1개의 PH 단위 안에 적어도 있는) pKa 이용하기 위하여 가치를 가진 완충기를 추천됩니다.
각 완충기의 적용 가능한 PH 범위
2. 실험 도중 PH 변화
또는 감소는 PH 값이 증가할지도 모르다 실험 도중 미리 고려해서 완충기의 선택에 중대합니다. 당신이 생각하는 경우에 PH는 실험, 당신 도중 실험 시작되는 시점에 최선 가치 보다는 더 높을 것이 pKa를 가진 완충기를 경미하게 선택해야 합니다 증가할 것입니다. 반대는 또한 진실합니다: 당신이 생각하는 경우에 PH는 더 낮은 pKa를 가진 완충기를 줄이고, 선택합니다.
3. 완충기 농도
완충기 농도는 실험 체계를 위한 충분한 완충능이 있기 위하여 조정되어야 합니다. 일반적으로 완충기 농도가 너무 낮은 경우에, 해결책의 PH는 안정될 수 없습니다. 농도가 너무 높은 경우에 반대로, 완충기는 확률이 높습니다 실험에 영향을 미치기 위하여. 일반적으로, 25mM 높이 보다 농도를 사용하기 위하여 추천됩니다.
수소 양성자 교환이 활동적이지 않 체계를 위해, 25-100mM의 농도는 일반적으로 추천됩니다. 양성자 교환이 일어날지도 모르다 체계를 위해, 완충기 농도 20times를 교환된 양성자의 어금니 농도 보다는 높이 사용하기 위하여 추천됩니다.
완충기 해결책을 준비할 경우, 예정한 사용 농도에 해결책 농도를 맞추는 것을 기억하십시오.
4. 온도 변화
당신은 실험이 실행될 온도에 따라 완충기 해결책의 PH를 놓아야 합니다. 온도는 직접 완충기의 pKa, 및 이렇게 체계의 PH 및 완충능에 영향을 미칩니다. 이 상황은 반응 체계가 효율성을 최대로 운영하도록 정확한 수소 이온 농도가 요구되는 생물 체계에서 긴요할지도 모릅니다.
몇몇 완충기의 pKa는 이 변화에 의해 (관과 같은) 온도 변화 그러나 다른 선택권에 보다 적게 과민합니다 (TRIS 에이스, 꼭지, TES, 또는 Tricine와 같은) 좀더 영향을 받습니다.
숫자는 아래에 Desheng Biobuffer의 온도에 따라 대략 pKa 변화를 보여줍니다:
Desheng Biobuffer 온도의 대략 pKa 변화
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