올바른 선택생물학적버퍼실험을 위한 많은 옵션이 있습니다 (Hepes, Mops, Tris, Bis-Tris, 등), 쉽게 혼란을 일으킬 수 있습니다.
이러한 도전을 이해한 데 셰 겐은 선택에 대한 참고를 위해 짧은 목록을 준비했습니다.버퍼연구용 소금:
1버퍼 범위
각 버퍼 반응제는 가장 강한 pH 범위를 가지고 있습니다.버퍼이 버퍼 용량은 일반적으로 pKa로 결정됩니다.버퍼원하는 범위의 중간에 가까운 pKa 값을 가진 버퍼를 선택해야합니다.버퍼pKa 값이 목표 pH의 pH 단위 한 개 이상인 경우)
각 버퍼의 적용 가능한 pH 범위
2실험 중에 pH 변화
실험 중에 pH 값이 증가하거나 감소할 수 있는지 미리 고려하는 것은 실험의 선택에 중요합니다.버퍼s. 실험 중에 pH가 증가할 것이라고 생각하면 실험 초에 최적의 값보다 약간 높은 pKa를 가진 버퍼를 선택해야합니다. 그 반대도 사실입니다.pH가 낮아질 것 같으면, pKa가 낮은 버퍼를 선택합니다.
3펌퍼 농도
버퍼 농도는 실험 시스템에 충분한 버퍼 용량을 갖도록 조정해야합니다. 일반적으로 버퍼 농도가 너무 낮으면,용액의 pH가 안정화 될 수 없습니다.반대로, 농도가 너무 높으면 버퍼가 실험에 영향을 미칠 가능성이 있습니다. 일반적으로 25mM 이상의 농도를 사용하는 것이 좋습니다.
수소 양성자 교환이 활발하지 않은 시스템에서는 일반적으로 25-100mM의 농도가 권장됩니다. 양성자 교환이 발생할 수 있는 시스템에서는버퍼양성자의 분자 농도가 교환된 양성자의 분자 농도보다 20배 높습니다.
의 준비 시버퍼용액, 용액 농도를 의도된 용도 농도에 조정하는 것을 기억하십시오.
4온도 변화
실험이 수행될 온도에 따라 펌퍼 용액의 pH를 설정해야 합니다. 온도는 펌퍼의 pKa에 직접적으로 영향을 미칩니다.그리고 따라서 시스템의 pH와 버퍼 능력이 상황은 생물학적 시스템에서 매우 중요 할 수 있습니다. 반응 시스템이 최대 효율으로 작동하려면 정확한 수소 이온 농도가 필요합니다.
일부 버퍼의 pKa (PIPES와 같이) 는 온도 변화에 덜 민감하지만 다른 옵션 (예를 들어TRIS, ACES, TAPS, TES 또는 Tricine) 이 이러한 변화로 더 많이 영향을 받는다.
아래 그림은 Desheng Biobuffer의 온도에 따라 대략적인 pKa 변화를 보여줍니다.
데싱 바이오버퍼 온도의 대략 pKa 변화
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