세포생물학과 분자생물학 연구에서, 293T 세포는 인간 배아 신장 세포줄로 변형되어과학 연구의 인기 있는 모델 시스템으로 변이하기 쉽고 외성 유전자의 좋은 표현으로 인해이 세포들이 건강하게 성장하고 생물학적 특성을 유지할 수 있도록 하기 위해서는, pH 안정성이 기초 중 하나인, 정확한 배양 조건의 통제가 중요합니다.HEPES 버퍼(4- (2-하이드록시에틸) -1-피페라지네테네섬산) 은 세포 배양 매체에서 pH 안정성을 유지하는 데 좋은 버퍼로서 대체 할 수없는 역할을합니다.이 기사에서는 HEPES의 적절한 pH 범위와 293T 세포를 재배 할 때 세포 배양에서 적용 전략에 대해 자세히 설명합니다..
HEPES의 역할과 중요성
HEPES는 매우 좋은 유기적 완충제로서 넓은 pH 범위 (일반적으로 6.8 ~ 8.2) 에서 용액의 pH 안정성을 유지할 수 있습니다.대부분의 생화학적 반응에 간섭하지 않으며 금속 이온과 안정적인 복합체를 형성하지 않습니다., 세포 배양, 효소 활동 연구 및 단백질 발현에서 널리 사용됩니다. 293T 세포에 대한 HEPES의 추가는 대사 활동으로 인한 pH 변동을 줄이는 데 도움이됩니다.세포가 적절한 성장 환경에서 있는지 확인합니다..
293T 세포의 이상적인 pH 환경
HEPES 자체는 넓은 버퍼 능력을 가지고 있지만, 293T 세포를 위한 배양 매체의 pH 설정은 여전히 세포의 생리적 선호도를 고려해야 합니다.연구 결과 293 세포 라인 (293T 포함) 은 가벼운 산성 환경을 선호합니다.그러나 실제 사용에서는 HEPES의 완충 효과와 세포 배양 매체의 보편성을 고려하면일반적으로 농경 매체의 pH 값을 7 사이로 조정하는 것이 좋습니다.0.0과 7.2이것은 약간 산성 환경에 대한 세포의 선호를 만족시킬뿐만 아니라 HEPES 버퍼 시스템의 효과를 보장합니다.알칼리성으로 인한 세포 성장 억제 또는 형태적 이상.
실제 적응 전략
1첨가된 HEPES의 양: 실험 요구 사항에 따라적절한 양의 HEPES를 첨가하면 세포 배양 과정에서 세포 대사에서 생성되는 산성 물질을 효과적으로 완충하고 pH 안정성을 유지할 수 있습니다..
2pH를 조정하기 위해 NaHCO3를 사용하는 것: HEPES가 주요 버퍼 구성 요소이지만, pH 값을 목표 범위로 초기적으로 조정하기 위해 NaHCO3를 배양 매체에 추가하는 것도 필요합니다.다른 팩트에서 NaHCO3의 순도와 제조업체 차이로 인해 pH 값이 약간 변할 수 있다는 점에 유의해야합니다.따라서 NaHCO3의 새로운 팩을 사용할 때, pH 미터는 농경 매체의 pH가 7-7 사이로 떨어지는 것을 보장하기 위해 캘리브레이션되어야합니다.2.
3정기적 인 모니터링 및 조정: 세포 배양 과정에서 배양 매체의 pH 값을 정기적으로 모니터링하고 필요에 따라 정밀 조정해야합니다.비록 HEPES는 강력한 버퍼 기능을 제공하지만, 장기간 세포 배양 또는 고밀도 세포 배양은 pH가 점차 변하게 할 수 있습니다.신선한 배양 매체 또는 적절한 HEPES 버퍼를 추가하는 것이 좋은 배양 상태를 유지하는 열쇠입니다..
4개인 맞춤: 다른 실험실에서의 실험 조건 (탄소 이산화 농도, 온도 등)) 및 세포 통로의 수가 세포의 pH에 대한 민감성에 영향을 줄 수 있습니다., 따라서 기본적인 지침 원칙을 준수하면서 실제 상황에 따라 개인 맞춤 조정이 필수적입니다.
요약하면, HEPES의 적절한 pH 범위를 이해하고 제어하는 것은 293T 세포를 키우는 데 기본적이고 중요한 단계입니다.정기적 인 모니터링 및 조정과 결합, 293T 세포를 위해 이상 상태에 가까운 성장 환경을 만들 수 있습니다.세포 배양은 과학과 예술입니다., 그리고 미묘한 조정은 종종 실험 결과에 상당한 개선으로 이어질 수 있습니다.생물학적 완충제, Desheng는 제조업체가 준비하고 사용할 수있는 99% 순수 원료를 공급 할 수 있습니다.자세한 사항은 문의하실 수 있습니다.!
