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생물학적 버퍼 TAE와 TBE의 비교

2020-09-18
생물학적 버퍼 TAE와 TBE의 비교

DNA 전자기술을 수행할 때 항상 버퍼 용액을 첨가합니다. 일반적으로 사용되는 버퍼 용액은 TAE, Tris, 아세테트 및 EDTA, 그리고 TBE (Tris-borate-EDTA) 를 포함합니다.

 

버퍼의 역할은 무엇입니까? 버퍼의 기능 중 하나는 용액의 pH를 안정적으로 유지하는 것입니다.산화 반응이 발생하여 산소와 수소 이온이 생성됩니다.; 수소와 수산화 이온을 생성하기 위해 카토드에서 환원 반응이 발생합니다. 장기 전자 분해는 아노드 산과 카토드를 알칼리화합니다.좋은 버퍼 시스템은 양극의 용액의 pH를 기본적으로 안정적으로 유지하기 위해 강한 버퍼 능력을 가져야합니다.전기 분해 버퍼의 또 다른 기능은 DNA 분자의 마이그레이션을 촉진하기 위해 용액이 특정 전도도를 갖는 것입니다.DNA는 전소분석 과정에서 음전하를 받는 알칼리성 물질 (버퍼 pH=8) 이며 음전극에서 양전극으로 이동한다.

 

전극분석 버퍼의 또 다른 구성 요소는 EDTA이며, 그 목적은 Mg2+ 플라스마를 켈레이트하고 전극분석 중에 DNase의 활성화를 방지하는 것입니다.EDTA는 핵산 분해를 방지하기 위해 이 이온을 단단히 붙잡을 수 있습니다.그러나 마그네슘 이온은 제한 효소, DNA 폴리메라세스 등 많은 효소의 코팩터이기도 함을 유의해야합니다.따라서 EDTA 농도는 일반적으로 너무 높지 않습니다 (일반적으로 1mM 정도).

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데??TRIS 버퍼포장

TAE나 TBE가 더 좋을까요? 실제로 DNA 전소분석에 어떤 것을 사용해야 할까요? 실험의 목적에 따라 달라집니다. 두 가지의 차이점을 살펴봅시다.

1. TBE의 전도성은 TAE보다 크다. 따라서 TAE에 비해 TBE는 전자기 탱크에서 과열을 일으킬 가능성이 적다.TBE는 장기 전기 분해에 권장됩니다..

 

2. 보리산은 효소 억제제이기 때문에 소화 반응을 위해 전자 분해 DNA를 분리해야하는 경우 TAE를 전자 분해 버퍼 용액으로 사용하는 것이 좋습니다.

 

3. TBE는 더 작은 조각을 분리하는 데 더 좋습니다. 300bp보다 작은 조각의 경우 TBE의 마이그레이션 속도는 2% 아가로스 젤에서 더 빠릅니다.

 

4. TAE는 큰 조각을 분리하는 데 적합합니다. 2kb 이상의 조각은 TAE (0.8% 아가로스 젤) 에서 더 빨리 이동하며 속도는 TBE보다 약 10% 더 빠릅니다.TAE는 DNA 파편의 복구를 위해 더 적합합니다.TBE와 비교하면 TAE는 초고환 DNA의 해상도가 높습니다.

 

요약하자면 TBE나 TAE가 더 나은지에 대한 질문은 일반화 될 수 없습니다. 가장 적합한 버퍼 시스템은 실험의 특정 목적에 따라 선택되어야합니다.데싱이 개발한 생물학적 버퍼는 넓은 버퍼 범위를 가지고 있습니다.이 시스템은 다양한 pH 값의 버퍼를 준비할 수 있으며 다양한 포장 사양을 제공할 수 있습니다.상담 및 구매를 환영합니다.