트리스의 버퍼 범위는 특히 단백질과 핵산의 관련된 연구 실험에, 가장 생화학적 실험을 위해 적당한 6-8에 대한 것입니다 ; 엡스는 또한 단백질과 핵산에 적합합니다. 연구 실험은 트리스 보다 더 비싸며, 그렇게 어느 것이 단백질 실험을 발견하도록 폴린 페놀 법에 적합합니까?
폴린 페놀 반응제 방법은 단백질 농축을 결정하기 위해 일반적으로 사용된 기초적인 방법을 있고 넓게 생화학의 분야에서 사용되었습니다. 응용에서, 엡스 (HEPPS)는 트리스 완충액을 사용하는 것보다 오히려, 단백질 함량을 발견하기 위해 보통 폴린 페놀 법을 위한 버퍼로서 사용됩니다.
버퍼 트리스와 엡스는 단백질 함량 탐지를 위해 사용됩니다
단백질 함량의 확정을 위한 폴린 페놀 법의 염색소는 뷰렛법의 그것과 같습니다 (그러나 엡스가 비우렛트 / 비우렛트 탐지를 위해 사용될 수 없습니다). 차이는 두번째 시약, 폴린 페놀 시약이 추가된다는 것입니다. 이로써 감지 단백질의 민감도를 향상시키면서, 색의 양을 증가시키기 위해. 단백질 함량을 발견하기 위한 폴린 페놀 법의 장점은 그것이 고감도를 가지고 있고, 뷰렛법 보다 훨씬 더 민감하다는 것입니다. 물론, 그것이 긴 시간이 걸리고, 표준 곡선이 곧지 않고, 전문성이 가난하고, 더 많은 방해 물질이 있다는 것이 또한 약간의 단점을 가지고 있습니다.
-CO-NH2, -CH2-NH2, CS-NH2와 트리스 완충액, 자당, 황산 암모늄과 설프하이드릴 화합물과 같은 뷰렛 반응을 방해하는 어떠한 그룹도 폴린 페놀 반응을 방해하고 매우 큰 후자에 영향을 미칠 수 있습니다. 게다가 페놀과 구연산은 또한 이 반응을 방해합니다.
폴린 페놀 시약은 2 시약으로 구성됩니다. 시약 1은 탄산 나트륨, 나트륨하이드록사이드, 구리 설페이트와 타르타르산나트륨칼륨으로 구성됩니다. 단백질에서 펩티드 결합은 퍼플-레드 복합체를 형성하기 위한 알칼리성 조건 하에 칼륨 나트륨 구리 주석산염 용액과 반응합니다. 두번째 시약은 포스포몰리브덴산, 인텅스텐 산, 황산, 취소와 기타로 구성됩니다. 알칼리성 조건 하에, 이 시약은 푸른 반응을 주기 위해 쉽게 단백질에서 타이로신의 석탄산 그룹에 의해 감소되고 그것의 색상 모드가 단백질 함량에 비례합니다. 이 방법은 또한 타이로신과 트립토판의 내용을 결정하는데 적합합니다. 이 법의 측정 범위는 25-250μg 단백질입니다.
개요에, 단백질 함량을 결정하기 위한 폴린 페놀 법의 이점은 고감도이지만, 그러나 단점이 그것이 긴 시간이 걸리고, 방해한다는 것입니다. 트리스는 또한 간섭을 야기시킬 수 있습니다. 엡스 버퍼는 사용되어야 합니다. 데성은 어느 것이 더 좋다고 말하고 다른 실험적인 연구에 적합하지 않기 위해, 이러한 버퍼 둘 다를 생산합니다.
