생물학적 완충액의 장점과 단점은 무엇입니까?
생물학적 완충액은 소량의 산/염기를 첨가할 때 용액의 pH 값을 비교적 안정적으로 유지할 수 있는 일종의 용액입니다.생물학적 완충액의 pH 범위는 pKa 값에 의해 결정됩니다.pKa 값은 분자의 50%가 산성 구조를 갖고 50%가 염기성 구조를 가질 때의 pH 값으로 정의됩니다.생물학적 완충액에 대한 일반적인 원칙은 pH 값이 pKa 값 주변의 1 pH 단위 이내여야 완충 능력이 우수하다는 것입니다.이러한 방식으로, H+ 또는 OH-가 첨가될 때 이들을 중화할 수 있는 충분한 분자가 산 구조 및 기본 구조에 동시에 존재함을 보장할 수 있다.이와 같이 완충액은 pH 변화로 인한 단백질 안정성의 변화를 방지할 수 있습니다.
생물학적 완충액에는 많은 물질이 사용될 수 있습니다.자주 사용되는 완충제 성분은 일반적으로 중성에 가까운 pKa 값을 가지며 생리학적 pH 범위에서 사용할 수 있습니다.다음은 가장 일반적으로 사용되는 3가지 생물학적 완충액, 각각의 pH 적용 범위, 단백질 정제 공정에 영향을 미칠 수 있는 장단점을 나열합니다.충분한 버퍼링 용량을 보장하기 위해 이러한 버퍼의 농도는 일반적으로 25mM입니다.
1. MOPS 완충액: PH 범위는 6.5-7.9이고 고압 멸균할 수 없으며 PH 값은 온도에 따라 어느 정도 변하며 생리학적 PH 값 범위 내에서 높은 완충 능력을 가지고 있습니다.
2. HEPES 완충 용액: PH 범위는 6.8-8.2이고 고압 멸균할 수 없으며 PH 값은 온도에 따라 어느 정도 변하며 특정 조건에서 자유 라디칼이 생성됩니다.
3. TRIS 버퍼: PH 범위는 7.5-9.0입니다.PH 값은 온도 또는 희석 정도에 따라 어느 정도 변화하며 이는 일부 효소 활성에 영향을 미칩니다.자외선 흡수가 없고 저렴합니다.
완충용액의 기능은 시험할 용액의 산도가 분석법에서 규정한 범위를 만족하도록 제한된 범위 내에서 용액의 pH 값을 조정하는 것입니다.예를 들어, 페놀은 알칼리성 매질 및 페리시안화칼륨의 존재하에 4-아미노아미노산과 결합될 수 있습니다.티피린은 주황색-적색 안티피린 염료를 생성하기 위해 반응합니다.방향족 아민의 간섭을 방지하기 위해 가장 적합한 pH는 10±0.2입니다.이 때문에 시험용액에 염화암모니아완충액을 첨가하여 시험용액의 pH를 10.0±0.2로 조절 및 조절하여야 한다.
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