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비정상이 PCR 증폭 곡선이 바이러스 운송 매체에 의해 초래됩니까 ?

2021-03-02
비정상이 PCR 증폭 곡선이 바이러스 운송 매체에 의해 초래됩니까 ?

새로운 코로나바이러스의 핵산 검출에, 매우 주요 기술은 새로운 코로나바이러스 탐지의 핵심 기술인 핵산의 실시간 휘황한 양적 PCR 실험입니다. 그래서 어떠한 효과가 바이러스 샘플링 조인트를 위해 바이러스에게 사용된 운송 매체를 주는지 핵산의 PCR 증폭에 영향을 줍니까? 이 기사는 간결한 논의를 합니다.

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바이러스 운송 매체는 핵산 PCR 증폭에 영향을 미칩니까?

PCR 증폭 곡선으로부터의 결과를 판단하는 것 :

새로운 크라운 탐지에서 휘황한 양적 PCR 기구는 분자 생물학 리서치를 위해 정기적 장비가 되었습니다. 또한 그들이 자료에 의한 결과를 판단함에 있어 익숙하도록 요구하면서, 이 탐지 방법의 급격한 발달과 검출 업무의 긴급 상황은 탐지 인력에 대한 더 높은 요구를 제시했습니다. 형광 양적 PCR에 의한 결과의 판단을 위해, 가장 직관적 판단은 증폭 곡선이 정상적인지 보는 것입니다. 정상적 실험에서, 당신은 할인된 증폭 곡선과 다중 웰 사이의 가난한 반복성과 음성 시료의 승강된 증폭 곡선과 같은 비정상이 증폭 곡선 사이의 문제에 직면할 것입니다.

 

비정상이 PCR 증폭 곡선에 대한 이유 :

1. 소프트웨어 설정이 정확한지 확인하세요. 시간, 온도, 사이클 횟수, 형광 수집, 기타 등등이 바르게 설정되는지고 선택된 반응제가 록스를 참조 형광 색소로서 포함하는지 확인하기 위해 키트 명령을 확인하세요. 약간의 결과는, 그것이 임계값 라인을 넘도록, 다성분 그래프의 증폭 곡선이 들어올려지지 않으며, 그것이 분명히 음성 시료이지만, 그러나 증폭 그래프 곡선이 들어올려진다는 것을 보여주고 그 대신에 CT 가치를 가집니다. 이것은 소프트웨어가 기준선의 자동 연역법에서 실수하기 때문입니다. 손으로 기준선을 조정하는 방법은 기준선을 재정의함으로써 정상적일 수 있습니다.

 

2. 그 소비재의 기구 부속물이 바르게 사용된다는 것을 확인하세요. 소비재의 더 실시간 PCR에 중요합니다. 많은 비정상인 증폭 곡선은 부적절한 사용에 의해 초래됩니다의 소비재의.

 

3. 사용된 시약이 정상적인지 결정하고 시약이 시약이 유효기간 내에 포함되는지 체크하는 것을 포함하여, 효과적인지고 그들이 반복해서 여러 번 동결되고 녹는지고 수송 조건이 정상적인 것을 처음으로 결정합니다. 모든 위에서 말한 것 정상적이면 당신은 운영 사항에서 어떠한 무관심도 있을지 고려하여야 합니다.

 

위에서 말한 포인트로부터, 바이러스 운송 매체가 직접적으로 증폭 곡선에 영향을 미치지 않을 것입니다, 그것이 바이러스 샘플만을 영향을 미칠 것이지만, 그러나 이것이 바이러스 보호 솔루션이 바이러스 샘플에 영향을 미치는지 결정하기 위한 양성 샘플에서의 제어 실험을 통하여 행해질 수 있다는 것이 보일 수 있습니다. . 2개 종류의 데성 바이러스 운송 매체가 있습니다, 둘다 불활성화된 유형과 활성화 유형이 핵산 PCR 실험에 적합합니다.