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아가로스 겔 전기 영동과 DNA

2021-02-04
아가로스 겔 전기 영동과 DNA

아가로스 겔 전기 영동은 차단, 식별을 위한 일반적으로 사용되는 방법이고 dna 단편의 정화입니다. DNA 분자가 아가로스 겔에서 헤엄치고 있을 때, 그들은 가전효과와 분자체 효과를 가집니다. DNA 분자는 부정적으로 등전점 위에 pH 해결책에서 고발되고, 전기장에서 양전극에 이동합니다. 글리코포스페이트 주축의 반복 구조 때문에, 같은 양의 이중 꼬임 dna는 똑같은 순용량을 거의 가지고 있고 따라서 그들이 똑같은 속도에 있는 긍정적인 방향에 이동할 수 있습니다.

 

아가로스 겔의 다른 집중은 200 베이시스 포인트에서부터 50kb까지 dna 단편을 분리할 수 있습니다. 아가로스 용액에서, 에티듐 진정제 (EB)의 저농도는 아가로스 용액에 부가되었습니다. 10NG의 DNA 밴드는 자외선 하에 검출될 수 있습니다. 전기장에서, 부정적으로 긴장된 DNA는 pH8.0에서 음극으로 이동했습니다.

 

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아가로스 겔은 다음과 같은 특성을 가집니다 :

(1) 겔 매트릭스에서 DNA의 분자 크기는 토대 대수의 가치와 크게 분자, 천천히 이동에 반비례합니다.

 

(2) 선형 dna 분자의 특정 크기에서 아가로제 농도는 다른 집중에 아가로스 겔과 다릅니다. DNA의 전기 이동 작용의 기체 운동 속도 (U)의 대수는 선형으로 겔 농도 (T)와 관련됩니다.

 

(3) 전압이 낮을 때, 선 dna 단편의 이동 비율은 인가 전압에 비례합니다. 그러나, 전계 강도의 증가와 함께, 다른 분자량과 dna 단편의 이동성은 다른 범위에서 증가할 것입니다. 전압의 증가와 함께, 아가로스 겔의 효과적인 분리 범위는 감소될 것입니다. DNA의 결의안을 극대화하기 위해 2KB보다 크서 분해됩니다, 인가 전압이 5V / 센티미터를 초과하여서는 안됩니다.

 

(4) 아가로스 겔 전기 영동에서 전기영동 온도 DNA의 전기 영동 행동은 전기영동의 온도에 의해 영향을 받지 않습니다. 다른 크기의 dna 단편의 상대적 이동 비율은 의미 심장하게 4와 30 도 변하지 않지만, 그러나 0.5%의 저농도와 겔 또는 저융점 겔이 오히려 4 도에, 상대적으로 약합니다.

 

(5) 형광 색소 에티디움 브로마이드가 익숙한 끼워진 염료는 아가로스 겔에서 DNA를 발견합니다. 그것을 더 엄격하고 15%까지 선 이동성을 감소시키게 하면서, 염료는 육체미 있는 기본 쌍과 기다랗고 금이 있는 고리 모양 dna 내장되었습니다.

 

(6) 이온 강도 전기 이동 버퍼와 그것의 이온 강도의 구성은 DNA 전기영동의 이동성에 영향을 미칩니다. 겔로 준비하기 위한 증류수의 남용과 같은 이온이 없을 경우에, 전도성은 최소이고 DNA가 거의 이동하지 않습니다. 고이온 강도 버퍼 (10개 X 전기 이동 버퍼와 같이)에, 컨덕턴스는 매우 높고 명백한 열생성입니다.

 

아가로스 겔 전기 영동은 또한 일반적으로 DNA 식별, DNA 제한 엔도뉴클레아제 지도 생산, 등과 같은 핵산의 차단과 식별에서 사용됩니다. 그것의 편리한 작동, 단순한 장비, 소표본 크기와 고해상도 때문에, 이 방법은 유전공학 연구에서 더 커먼 실험적인 방법 중 하나가 되었습니다. 아가로스 겔 전기 영동 장비는 10번 아가로제 수행, 고전압 빠른 전기영동 솔루션 15mL, 8 홀 6*6, 6 홀 6*6, 13 홀 6*12, 18 홀 6*12와 다른 규격으로, 가위와 사용자 교범인 buffer6x 200 L를 로딩하는 DNA를 포함합니다.